Western Blot Dictionary - Mandarin

蛋白质印迹词典

蛋白质印迹中最常用的术语列表,每个术语附有少量解释。

蛋白质印迹是一种用于确定样品中是否存在所选蛋白质的技术。首先,通过凝胶电泳根据大小分离蛋白质。此后,通过使用电流将蛋白质转移到通常为硝酸纤维素膜或PVDF的膜上。然后用对目标蛋白质具有特异性的抗体对膜进行染色,从而可以获取有关蛋白质的定性或半定量信息。

术语 解释 半定量

阴离子

带负电的离子。在电解中吸引阳极。

阴极

阴极是带负电的电极。它可以充当电子源或电子供体。

APS

过硫酸铵。APS引发丙烯酰胺混合物的聚合。它提供了发生聚合所必需的自由基。

BCA

比辛尼酸测定法。生化光谱法测定溶液中蛋白质的总浓度。

封闭

蛋白质印迹膜被封闭以防止非特异性结合。

Bradford测定法

光谱蛋白质测定法,用于测量溶液中蛋白质的浓度。测定取决于所测蛋白质的氨基酸组成。

化学发光

化学发光是化学反应产生的光。两种化学物质反应形成一个受激的中间体,该中间体分解后释放出一些能量,成为光子到达基态。

变性

蛋白质丧失其四级、三级和二级结构的过程。

洗涤剂

洗涤剂具有独特的特性,可破坏生物样品中的疏水-亲水相互作用。

二硫键

二硫键是衍生自两个巯基的共价键。二硫键可帮助氧化后蛋白质的折叠。

ECL

增强型化学发光。在用HRP标记抗体时使用,添加了化学发光底物(例如鲁米诺)和氧化剂(例如H2O2),它们形成了受激的中间体,并在540nm处发射。

表位

免疫系统识别的一部分抗原。

提取缓冲液

也称为裂解缓冲液,用于从细胞中提取蛋白质。

荧光团

激发时可以发光的荧光化合物。

凝胶电泳

凝胶电泳用于根据分子大小分离DNA、RNA或蛋白质的混合物。

离子

在离子键合中,原子将电子彼此转移。离子键需要至少一个电子给体和一个电子受体。

Lameli缓冲液

Lameli缓冲液包含β-2-巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT),在采用无规卷曲构型并进而使蛋白质变性之前,它们的作用是还原二硫键。Lameli缓冲液中除了甘油使样品更致密外,还有SDS成分,可提供凝胶电泳所需的负电荷。

上样缓冲液

例如,将Lameli缓冲液添加到蛋白质中来实现可视化和凝胶迁移。

裂解缓冲液

用于从细胞中提取蛋白质。

硝酸纤维素膜

用于蛋白质印迹转移的膜,具有高蛋白结合亲和力,并且与多种检测方法兼容。蛋白质通过疏水相互作用固定。

非特异性结合

非特异性结合是指配体与其指定受体以外的物质的结合。

天然蛋白质

蛋白质的天然状态是指处于适当折叠状态且具有操作功能的蛋白质。

一抗

一抗是一种免疫球蛋白,可与目标蛋白质特异性结合,以纯化或检测和测量该蛋白质。

探测

用于鉴定和定量二抗与一抗的结合,并确定样品中蛋白质的量。

PVDF

聚偏二氟乙烯(PVDF)是由偏二氟乙烯聚合而成的高非反应性热塑性含氟聚合物,对氨基酸无特异性亲和力。

定性分析

定性分析有助于确定被测分析物的存在与否。

定量分析

定量测定可测量分析物的存在、数量或功能活性。

分离凝胶

分离凝胶是凝胶的底部和较大部分。首先被倒入。

RIPA缓冲液

RIPA(放射免疫沉淀分析)缓冲液用于裂解和提取培养细胞中的蛋白质。

SDS

十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子洗涤剂,它能使蛋白质部分变性和覆盖。

SDS-PAGE凝胶电泳

SDS-PAGE凝胶电泳使用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质,并使用SDS使蛋白质变性。

二抗

二抗结合一抗。二抗结合使得能够检测和纯化靶抗原。二抗必须对所使用的一抗的抗体种类和同种型具有特异性,并且通常会缀合以实现化学发光或荧光检测。

半定量

产生物质的数量或量的近似值;在定性和定量结果之间。

物种特有性

指抗体或药物的作用或作用仅限于特定物种。

堆积凝胶

将堆积凝胶倒在分离凝胶上,将梳子放入该凝胶中。需要堆积凝胶将所有蛋白质集中/包装在一条带中,以便它们同时开始在运行凝胶中迁移。

TEMED

TEMED充当催化剂以加速凝胶的聚合反应。加入TEMED后立即倒入凝胶。

转移

指将分离的蛋白质转移到将要探测的膜上,并确定样品中蛋白质的量。

Tris

Tris是调节凝胶pH值的首选缓冲液。堆积缓冲液的pH通常为6.8,分离凝胶的pH为8.8。


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